Nikon A1共聚焦+N-STORM超高分辨率显微成像系统

【仪器性能】

显微镜:倒置研究级电动显微镜Eclipse Ti-E

激光器:405nm、561nm、647nm(固体激光器),多线氩离子激光器(457、477、488、514nm)

物镜:平场复消色差型物镜:10×,20×,40×空气镜,60×油镜,100×油镜

荧光探测器:A1R共聚焦部分:四通道荧光检测器(2个高灵敏度GaAsP检测器+2个PMT检测器);

                       TIRF/STORM部分:高灵敏度Andor iXON 897 EMCCD(512*512分辨率)。

分辨率:A1R共聚焦成像: XY轴分辨率可达200nm,Z轴分辨率达500nm;

               STORM成像: XY轴分辨率可达20nm,Z轴分辨率达50nm。

扫描速度: 双扫描单元设计, 512*512分辨率下, 检流计式扫描单元可达10fps,共振扫描单元可达30fps。

【仪器特点】

1、  该系统整合了Nikon激光共聚焦成像系统A1R和随机光学重建(STORM)超分辨成像技术。具有共聚焦系统的所有常规功能。

2、  该系统支持2D-STORM(最多可做三色荧光成像)和3D-STORM。STORM成像分辨率可达普通光学显微镜的十倍,XY轴可达20nm,Z轴达50nm。

3、  该系统配有电动全内反射(TIRF)照明器,支持TIRF成像模式。

4、  该系统A1R配备混合扫描器系统,可同步光活化和成像过程,512*512分辨率下,扫描速度最快可达30fps。

5、  配备活细胞培养系统,完美聚焦系统(PFS)和电动载物台,可进行活细胞样品长时间观察成像,并可做多位点平行观察和大视野拼图。

6、  NIS-Elements软件实现系统硬件控制,多维图像采集(X、Y、Z、T、λ、multipoint)和各种图像分析功能(荧光定量、共定位分析、三维重构、FRAP等)。

【技术应用】

根据实验目的不同, 可以选择三种不同的工作模式 (传统共聚焦、TIRF成像或者STORM成像)以获取高质量的荧光图像,可用于观测固定细胞,活细胞,动植物组织等,具体应用包括:

1、 多标记荧光成像。基本能覆盖所有常见的荧光蛋白和染料,可同时检测四种荧光标记。可同时采集透射光图像。

2、  三维(XYZ)共聚焦图像的采集,重构和分析。

3、  时间序列荧光成像和分析。

4、  多位点成像或者大视野拼图。

5、 离子浓度测量。

6、 各类光操作实验(FRAP、photo-activation,受体漂白法FRET等)。